手套箱內的惰性氣體經循環風機和凈化器密閉循環，不斷地除水除氧
1、抽真空與充氣：先打開過渡室里面的門，關上手套接口壓蓋、閥門和過渡室外的門。打開手套口之間的三通閥，使得抽氣時手套內外同時抽真空，保持兩邊氣壓平衡。將真空泵接到過渡室一個閥門上，開啟真空泵，緩緩打開此閥門，對系統抽氣。待真空表指針下降并穩定在-0.1MPa時，抽真空完成，此時應先關閥門再關真空泵。然后通過另一閥門向箱體內充入惰性氣體，直至氣壓比大氣壓略高一點，可保證大氣不會滲入箱體內部（重復三次）。
2、物件放入主箱體：當完成上述抽真空與充氣的操作后，先將過渡室的內門關上，打開過渡室的外門，將物件放入，然后關上外門，利用過渡室上的二個閥門進行抽氣和充氣。務必使主箱體和過渡室內的壓力與大氣壓基本平衡，才能打開里面的門，將物件拿進主箱體。
3、物件取出主箱體：先將物件放入過渡室，關緊過渡室內門。如過渡室內氣壓與大氣壓基本平衡，即可打開過渡室外門將物件取出。不管打開內門還是外門，都必須保證門兩邊的氣壓基本平衡，否則，要么打不開，要么發生氣爆現象。
4、操作注意事項：實驗前必須進行全盤的周密計劃，對每一步實驗的具體操作、所用的儀器、加料次序、后處理的方法等都要考慮周全。在操作中必須嚴格認真、一絲不茍、動作迅速、操作正確。實驗時要先動腦后動手
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